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在實驗室進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),區(qū)分細(xì)胞類型非常重要。常見的細(xì)胞培養(yǎng)類型有原代細(xì)胞、細(xì)胞系這兩種,它們之間有啥區(qū)別呢?如何通過細(xì)胞特征來分辨?本文為大家詳細(xì)介紹一下細(xì)胞系和原代細(xì)胞之間的區(qū)別。
定義:原代細(xì)胞是直接從活體組織(如皮膚、內(nèi)臟、血液等)通過酶消化(如胰蛋白酶)或機(jī)械分離法獲取的單細(xì)胞,首次在體外培養(yǎng)的細(xì)胞。
生命周期:原代細(xì)胞的分裂能力有限,其可傳代次數(shù)因細(xì)胞類型、來源(如供體年齡)和培養(yǎng)條件等因素而異,通常在進(jìn)入衰老前只能進(jìn)行數(shù)十次分裂。
定義:細(xì)胞系是指原代細(xì)胞經(jīng)首次傳代成功后建立的細(xì)胞群體。根據(jù)其增殖潛能,細(xì)胞系可分為兩類:
有限細(xì)胞系:它們是原代細(xì)胞傳代后直接形成的,增殖能力有限,經(jīng)過一定次數(shù)的分裂后會進(jìn)入衰老期。
無限細(xì)胞系:它們是有限細(xì)胞系在培養(yǎng)過程中發(fā)生轉(zhuǎn)化,或直接來源于腫瘤組織,從而獲得了無限增殖能力的細(xì)胞群體,可以被永久傳代培養(yǎng)。
難點:分離技術(shù)要求較高(需無菌、快速操作),貼壁率低,存活時間短,需優(yōu)化培養(yǎng)基成分(如添加生長因子)
成本:細(xì)胞來源活體,取材成本較高,培養(yǎng)試劑較為昂貴。
優(yōu)勢:標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)流程,適合常規(guī)培養(yǎng)基(如DMEM+10%胎牛血清),易于凍存和復(fù)蘇。
成本:價格低廉、可大規(guī)模擴(kuò)增。
原代細(xì)胞的適用場景:
藥物研發(fā):更精準(zhǔn)預(yù)測體內(nèi)藥效/毒性(如藥物EC50值在細(xì)胞系與原代細(xì)胞間差異顯著)
個性化醫(yī)療:患者來源的原代細(xì)胞(PDCs)用于個體化藥物篩選(如膽管癌對雷公藤紅素的敏感性測試)。
基礎(chǔ)研究:細(xì)胞分化、信號通路、代謝研究(如脂代謝模型需原代脂肪細(xì)胞)
局限:批次間差異大,實驗可重復(fù)性低。
細(xì)胞系的適用場景:
高通量篩選:大規(guī)模基因編輯(如CRISPR/Cas9文庫篩選)、藥物初篩。
機(jī)制研究:過表達(dá)/敲除基因的功能驗證(如NG108-15細(xì)胞用于神經(jīng)內(nèi)分泌研究)
局限:遺傳漂變可能導(dǎo)致結(jié)論偏差,體內(nèi)外結(jié)果一致性低。
鑒于原代細(xì)胞和細(xì)胞系在生物學(xué)特性上存在本質(zhì)區(qū)別,這會直接影響實驗設(shè)計的有效性和結(jié)果的可靠性。因此,無論是實驗室的新手還是資深研究者,都必須掌握準(zhǔn)確辨別并正確處理這兩種細(xì)胞的能力,這一點至關(guān)重要。
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