英文名稱 ： Creatine Content Assay Kit
產(chǎn)品包裝 ： 盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 ： 50T/24S
儲(chǔ)存條件 ： -20℃
檢測(cè)方法 ： 可見分光光度法
有 效 期 ： 6個(gè)月
產(chǎn)品內(nèi)容：
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試劑名稱
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規(guī)格
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保存條件
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提取液一
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液體30mL×1瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液體5mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑一
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粉劑×2支
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-20℃保存
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試劑二
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粉劑×2支
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-20℃保存
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試劑三
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粉劑×2支
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-20℃保存
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試劑四A液
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液體15 mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑四B液
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液體15mL×1瓶
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2-8℃保存
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標(biāo)準(zhǔn)品
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粉劑×1 支
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2-8℃保存
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產(chǎn)品說明：
肌酸(Creatine)是一種含氮化合物，自然存在于脊椎動(dòng)物體內(nèi)，能夠輔助為肌肉和神經(jīng)細(xì)胞提供能量。肌酸可由精氨酸(arginine)、甘氨酸(glycine)及甲硫氨酸(methionine)三種氨基酸合成，可由人體自行合成，也可以從食物中攝取。大約95%的肌酸存在于骨骼肌中，主要存在形式為磷酸肌酸。
肌酸作為一種補(bǔ)充劑主要通過增加肌肉質(zhì)量，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)表現(xiàn)能力。肌酸也被作為神經(jīng)肌肉疾病的一種治療藥被廣泛研究，它可能有助于保護(hù)神經(jīng)和改善細(xì)胞生物功能狀態(tài)。肌酸酶偶聯(lián)肌氨酸氧化酶，可將肌酸轉(zhuǎn)化為甘氨酸、甲醛、過氧化氫，過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替比林偶聯(lián)酚，生成有色化合物，在505nm有特征吸收峰。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水、超聲破碎儀。
注意事項(xiàng)：
1、顯色完成后，請(qǐng)?jiān)?0min之內(nèi)完成檢測(cè)。
2、提取液中含有蛋白沉淀劑，提取的上清液不能用于蛋白濃度的測(cè)定。若想要用蛋白濃度計(jì)算肌酐含量需要另取組織或血清(漿)，即取相同質(zhì)量(體積)的組織(血清(漿))用1.1875mLPBS(生理鹽水)勻漿(相當(dāng)于提取步驟最終樣本上清液)，用BCA法進(jìn)行蛋白濃度測(cè)定。
3、如果測(cè)定吸光值超過標(biāo)準(zhǔn)管吸光值，建議用蒸餾水稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。如果測(cè)定吸光值過小，建議增大樣本量后再進(jìn)行測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1、取0.1g大鼠肌肉加入1mL提取液一進(jìn)行勻漿研磨離心，取0.8mL上清后加0.15mL提取液二，離心取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.752-0.012=0.74，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.672-0.014=0.66。按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：肌酸含量(μg/g質(zhì)量)=208.76×ΔA÷ΔA標(biāo)÷W=2340μg/g質(zhì)量。
2、取100μL牛血清加入1mL提取液一，取0.8mL上清后加0.15mL提取液二，離心取上清，之后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.061-0.016=0.045，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.672-0.014=0.66。按照液體體積計(jì)算含量得：肌酸含量(μg/mL)=2296.39×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)=156.57μg/mL血清。
