半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)/活性檢測試劑盒/50T

品牌：紀寧生物

貨號：JN37912

規格： 50T/24S

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英文名稱：Cysteinyl Sulfoxide Lyase(CSL)Activity Assay Kit

產品包裝：盒裝

產品規格：50T/24S

儲存條件：2-8℃

檢測方法：可見分光光度法

有效期：6個月

產品組成：

產品說明：

半胱氨酰亞砜裂解酶，簡稱蒜酶，又名蒜氨酸酶。半胱氨酰亞砜裂解酶幾乎存在于所有蔥屬植物中，如大蒜，洋蔥，韭菜等。蒜氨酸酶存在于液泡內，其天然底物蒜氨酸存在于細胞質中；蒜氨酸酶與蒜氨酸接觸并催化產生蒜素和順、反式阿霍烯并生成丙酮酸和氨等副產物，也是大蒜等植物辛辣氣味的主要來源。

半胱酰胺亞砜裂解酶可以催化S-甲基-L-半胱氨酸亞砜生成丙酮酸。丙酮酸可與2,4-二硝基苯肼反應生成2,4-二硝基苯腙，在堿性條件下顯棕紅色；測定505nm吸光度的變化，即可計算CSL酶活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗，如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、水浴鍋/恒溫培養箱、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水和冰。

注意事項：

1.如果測定結果?A測定＞1，可以對樣本用蒸餾水進行稀釋或者縮短第一步反應時間；吸光值較小，可以加大樣本量或者延長第一步反應時間至1h或者更長時間。注意計算時同步修改計算公式。

2. 對于初次測定樣本，建議將樣本勻漿液用蒸餾水進行梯度稀釋后測定，選取最佳的稀釋倍數。洋蔥、香菇、大蒜類樣本建議直接稀釋4-10倍后再進行最佳稀釋倍數摸索。(實驗室洋蔥進行了8倍稀釋，蒜進行了64倍稀釋)

實驗實例：

1、稱取0.1233g蒜樣本，加入提取液進行冰浴勻漿，對上清用蒸餾水稀釋64倍，按照測定步驟操作，用1mL玻璃比色皿測得計算?A測定=A測定-A對照=0.689-0.184=0.505，?A標準=A標準-A標準空白=0.738-0.026=0.712，帶入公式計算：

CSL活性(U/g質量)=0.0208×?A測定÷?A標準÷W×F=7.658U/g質量。

2、稱取0.1263g洋蔥樣本，加入提取液進行冰浴勻漿，對上清稀釋4倍，按照測定步驟操作，用1mL玻璃比色皿測得計算?A測定=A測定-A對照=0.66-0.411=0.249，?A標準=A標準-A標準空白=0.738-0.026=0.712，帶入公式計算：

CSL活性(U/g質量)=0.0208×?A測定÷?A標準÷W×F=0.230U/g質量。