手機掃碼訪問本站
微信咨詢
|
一、基本信息 |
|
|
細胞名稱 |
|
|
細胞編號 |
JN-CC2505 |
|
細胞品牌 |
紀寧生物 |
|
細胞規格 |
1x10?cells/T25培養瓶或者1mL凍存管 |
|
種屬來源 |
人 |
|
組織來源 |
淋巴 |
|
細胞形態 |
淋巴母細胞樣 |
|
活性檢測報告 |
|
|
細胞簡介 |
RAMOS細胞來源于一位3歲的白人Burkitt's淋巴瘤患者。RAMOS細胞EBV陰性，表達IL-4受體和低親和性IgE受體(CD23)；每個RAMOS細胞表面大約有1500個IL-4的結合位點。RAMOS細胞可分泌IgM，表達膜型和分泌型的免疫球蛋白。 |
|
puro藥篩濃度 |
RAMOS-LUC細胞puro藥篩濃度為0.5ug/ml，培養過程中可不用再添加puro，如若擔心抗性隨著傳代時間降低，可定期用0.2ug/ml濃度puro維持 |
|
細胞代數 |
p3-p8 |
|
生物安全等級 |
1 |
|
生長特性 |
貼壁生長 |
|
生長條件 |
氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
|
保藏機構 |
ATCC; CRL-1596 DSMZ; ACC-603 ECACC; 85030802 ECACC; 91030710 |
|
培 養 基 |
90%RPMI-1640+10% FBS+1%PS |
|
凍存條件 |
無血清凍存液，液氮儲存 |
|
細胞貨期 |
現貨，1周左右 |
|
發貨方式 |
復蘇發貨（T25瓶免運輸費用）/ 凍存發貨（需加干冰運輸費用） |
|
供應范圍 |
僅限于科研實驗使用，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 |
|
二、細胞培養操作 |
|
|
Ｔ25瓶 |
|
|
收貨處理 |
觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養箱放置2-4h，以便穩定細胞狀態 |
|
傳代密度 |
細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養 |
|
傳代比例 |
首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 |
|
傳代方法 |
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心3-5min分鐘，棄去上清液，補加1-2ml培養液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 方法二：可選擇半數換液方式，半數培養基離心重懸后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
|
注意事項 |
懸浮細胞收貨注意事項： 1、收貨時需鏡下拍照（看密度、狀態） 2、靜置后需鏡下拍照（看整體密度） a. 如密度50%以下，建議換液并豎瓶培養 b. 如密度50%-80%，建議換液培養，隔天觀察密度 c. 如密度90%，建議傳代 3、換液及傳代處理前，培養瓶豎著放置至少半小時（使細胞沉到瓶底）；收集上清，必須將瓶內所有培養基（70ml）全部收集！并用PBS（10ml）潤洗瓶底并收集！離心轉速為1000rpm，5min。 4. 運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。 5. 因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現象。 |
|
凍存管 |
|
|
收貨處理 |
到細胞后，需立即轉入液氮凍存或直接復蘇 |
|
傳代密度 |
第二天換液并檢查細胞密度 |
|
傳代比例 |
一管細胞建議接種到10cm培養皿或者T25瓶 |
|
傳代方法 |
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養基，培養過夜）第二天換液并檢查細胞密度。 |
|
注意事項 |
1. 收貨時若發現干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細胞接種觀察，若未融化可以將細胞按正常步驟保存。 2. 為保證細胞的高存活率，收到產品后，請立即解凍復蘇細胞。 |
|
三、細胞凍存操作 |
|
|
凍存液配方 |
無血清凍存液，液氮儲存 |
|
細胞密度 |
待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例 |
|
凍存方法 |
a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。 b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5x106~1x107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
|
注意事項 |
凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調整實驗方案 |
|
四、售后服務 |
|
|
細胞予重發 |
1.細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等，重發。 2.收到細胞未開封，如出現污染狀況，重發。 3.收到細胞3天內，發現污染問題，經核實后，重發。 4.常溫發貨的細胞靜置2小時后，干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后，絕大多數細胞未存活，經核實后，重發。 5.常溫發貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后，出現污染，經核實后，重發。 6.細胞活性問題，請在收到產品3天內給我們提出真實的實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經核實后，重發。 |
|
細胞不重發 |
1.客戶操作造成細胞污染，不重發。 2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好，不重發。 3.非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發。 4.細胞狀態不好，未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片，不重發。 5.細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的，不重發。 6.收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發。 |
|
五、特別說明 |
|
|
上海紀寧生物客戶購買本公司的細胞過程中，有任何技術問題或實驗問題，都可以撥打我們的免費服務電話15800441226 / 021-54721350，我們隨時給予技術中／實驗中的免費解答。 |
|
