大鼠羊膜上皮細胞

品牌：紀寧生物

貨號：JN25556

規(guī)格： 5×10?Cells

聯(lián)系方式：021-54721350

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產(chǎn)品詳情

大鼠羊膜上皮細胞
基本信息
產(chǎn)品名稱：大鼠羊膜上皮細胞
產(chǎn)品品牌：紀寧生物
組織來源：胎盤組織
產(chǎn)品規(guī)格： 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介

大鼠羊膜上皮細胞分離自胎盤組織；胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯(lián)合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿浴?/span>

胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。

羊膜是胎盤的最內層，與眼結膜組織結構相似，含有眼表上皮細胞，包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質，其光滑，無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成，均具有多分化潛能，可轉化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。

方法簡介

紀寧生物實驗室分離的大鼠羊膜上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

質量檢測

紀寧生物實驗室分離的大鼠羊膜上皮細胞經(jīng)C ytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達9 0% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培養(yǎng) 基：含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài) ：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
傳代比例： 1:2
消化液： 0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95% ；C O2，5%
大鼠羊膜上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用紀寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

使用方法

大鼠羊膜上皮細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈上皮細胞樣，在紀寧生物技術部標準操作流程下，細胞可傳1-2代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作

1.取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。
2)添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入3-5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻，調整合適密度按實驗需求接種對應實驗器皿，然后按器皿大小補
充適當新鮮的完全培養(yǎng)基，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4)待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察，用于實驗；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1% ），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

大鼠羊膜上皮細胞

注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們紀寧系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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