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基本信息
產品名稱 ： 雞卵泡顆粒細胞
產品品牌 ： 紀寧生物
組織來源 ： 雞卵泡組織
產品規格 ： 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
雞卵泡顆粒細胞分離自雞卵泡組織。成熟卵泡是卵巢的組織結構成分之一，卵泡腔很大，卵丘很明顯。卵泡內膜細胞緊靠卵泡顆粒層，與顆粒層細胞之間有一層基膜相隔，內膜細胞呈多邊形，胞質清亮，胞核圓形，細胞間可見許多毛細血管，外膜細胞位于最外層，多呈梭形，與周圍結締組織分界不明顯。
卵泡(follicle) 中卵母細胞四周有一層菱形或扁平細胞圍繞，在卵泡開始發育、卵細胞成長的同時，周圍的菱形細胞變為立方形，并由單層增生成復層，因其細胞漿內含有顆粒，故稱為顆粒細胞。初級卵泡的顆粒細胞為單層。次級卵泡的顆粒細胞增至復層。成熟卵泡的顆粒細胞展開又變為單層。顆粒細胞的胞核大而圓，著色深，細胞的游離面有許多細長突起伸入放射帶的凹陷部。
方法簡介
紀寧生物實驗室分離的雞卵泡顆粒細胞采用先機械分離后膠原酶-胰蛋白酶聯合消化法、并通過專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
紀寧生物實驗室分離的雞卵泡顆粒細胞經FSH R 免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ： 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 貼壁
細胞形態 ： 上皮細胞樣
傳代特性 ： 可傳1代
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0. 25% 胰蛋白酶
培養條件 ： 氣相 ： 空氣，95% 。C O2，5%
雞卵泡顆粒細胞體外培養周期有限。建議使用紀寧生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
雞卵泡顆粒細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈上皮細胞樣，在紀寧生物技術部標準操作流程下，細胞可傳1代。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1. 取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
雞卵泡顆粒細胞
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
