1. 將偶聯好抗原或抗體的填料或瓊脂糖凝膠放入5-10 ml純化柱中，棄去保存液。

2. 純化柱中加入10 ml預洗脫液洗脫一次，棄去流穿液。

3. 純化柱中加入10 ml洗脫液，得到的流穿液即為抗體。棄去前3 ml流穿液，后面7 ml分成7管，每管接1 ml流穿液，抗體收集管中預先加入50 ul收集液。

4. ELISA檢測7管抗體的效價，保留效價最高的2-3 ml抗體。

5. 抗體長期保存可加入40%甘油和0.05%疊氮鈉，-20℃~-80℃保存。