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Fmoc-L-天冬氨酸beta-叔丁酯又叫Fmoc-Asp（oBut）-OH，是一種化工中間體，常用于多肽合成過(guò)程，用于氨基酸保護(hù)。
一種Fmoc-L-天冬氨酸beta-叔丁酯的制備方法，該方法一步制得Asp.oBut(oBut)，Asp.oBut(oBut)皂化后與Fmoc-OSU反應(yīng)即得Fmoc-Asp（oBut）-OH，減少了反應(yīng)步驟，提高生產(chǎn)效率。其包括如下步驟：
步驟一：分別取叔丁醇、天冬氨酸、氯化亞砜，按照質(zhì)量比為5:（0.8-1.5）:（0.8-1.5）取三者均勻混合，隨后在反應(yīng)溫度為50-60℃的條件下，反應(yīng)18-30h，得到Asp.oBut(oBut)溶液。
步驟二：用堿液調(diào)節(jié)Asp.oBut(oBut)溶液至中性質(zhì)弱堿性。堿液選自氨水、碳酸鈉溶液或氫氧化鈉中的任意一種。
步驟三：按照乙酸乙酯與叔丁醇的質(zhì)量之比為1:0.8-1.5取乙酸乙酯，對(duì)Asp.oBut(oBut)進(jìn)行萃取，然后用濃度為8-12wt%的氯化鈉溶液洗滌乙酸乙酯層，隨后將洗滌后的乙酸乙酯進(jìn)行濃縮，濃縮至質(zhì)量為原液的30%-40%，得到濃縮液。
步驟四：向濃縮液中加入丙酮溶液以及碳酸鈉溶液進(jìn)行皂化，皂化完成加入Fmoc-OSU至反應(yīng)完全。
步驟五：用乙酸乙酯對(duì)步驟四中得到的反應(yīng)液進(jìn)行二次萃取，然后用氯化鈉溶液洗滌乙酸乙酯層，隨后加熱濃縮干燥即得。
在2000mL三口瓶中加入581g醋酸叔丁酯和133g天冬氨酸，攪拌，滴加96.5mL高氯酸，在10℃下反應(yīng)48小時(shí)，降溫至0℃，再加入700mL水，萃取(剩余的醋酸叔丁酯作為溶劑萃取)，用Na2CO3中和至pH＝7，分液，減壓濃縮醋酸叔丁酯層，制得Asp(OtBu)2、Asp(OtBu)與Asp-OtBu油狀物的混合物，油狀物與水層合并待用。
將所得混合物轉(zhuǎn)入3000mL三口瓶，加入125gCuSO4·5H2O，用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH為3，攪拌升溫至50℃，反應(yīng)12小時(shí)，制得Cu[Asp(OtBu)]x(x＝1～2)；再降到室溫，加入116.2g四甲基乙二胺和300mL二氧六環(huán)，再用三乙胺調(diào)節(jié)pH為8～9，制得Asp(OtBu)；再在Asp(OtBu)中加入82gFmoc-OSu，維持pH為8～9，反應(yīng)8小時(shí)，再經(jīng)乙酸乙酯萃取，酸化，水洗，減壓蒸餾，結(jié)晶，烘干，制得85gFmoc-L-天冬氨酸beta-叔丁酯，收率20.7％。
通過(guò)HPLC對(duì)Fmoc-L-天冬氨酸beta-叔丁酯進(jìn)行分析，F(xiàn)moc-L-天冬氨酸beta-叔丁酯的純度為99.2％，旋光度為-23.5，熔點(diǎn)為147.9～149.5，異構(gòu)體含量為0.18％。
[1][中國(guó)發(fā)明]CN201811071184.5一種Fmoc-Asp（oBut）-OH的制備方法
[2][中國(guó)發(fā)明,中國(guó)發(fā)明授權(quán)]CN201310169364.8一種芴甲氧羰酰天冬氨酸-4-叔丁酯的制備方法